毕赤培养基与试剂

培养基系列

毕赤培养基与试剂

毕赤培养基与试剂	应用
YPDS Broth粉剂培养基	为YPDS液体培养基，在YPD培养基中添加高浓度山梨醇，兼具常规培养与渗透压调节双重功能，适配多种酵母菌（酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母等）的增殖、传代、转化及敏感菌株培养。可用于质粒转化后的复苏培养，也可用于各种敏感酵母菌的扩繁和传代培养。
YPDS with Agar 粉剂培养基	为YPDS固体培养基，在YPD培养基中添加高浓度山梨醇，兼具常规培养与渗透压调节双重功能，适配多种酵母菌（酿酒酵母、粟酒裂殖酵母、毕赤酵母等）的增殖、传代、转化及敏感菌株培养。特别是在毕赤酵母筛选阳性菌落时多用 YPDS ，在山梨醇的渗透压保护下可以提高细胞存活率，提升 Zeocin 抗生素的筛选效率。
PAD Agar 粉剂培养基	一种由确定成分组成的全合成酵母培养基，缺失腺嘌呤(Ade)，含有除腺嘌呤外的所有必须氨基酸、尿嘧啶、微量元素、大量元素、维生素、葡萄糖等营养成分，可以用来筛选含有表达腺嘌呤合成基因的酵母，主要用于PichiaPink1、2、3、4四种毕赤酵母的质粒转化筛选试验。
PD with Agar粉剂培养基	一种半合成腺嘌呤缺陷酵母培养基，缺失腺嘌呤(Ade)，含有除腺嘌呤外的所有必须氨基酸、尿嘧啶、微量元素、大量元素、维生素、葡萄糖等营养成分，可以用来筛选含有表达腺嘌呤合成基因的酵母，主要用于PichiaPink1、2、3、4四种毕赤酵母的质粒转化筛选试验
MD/MDH Broth粉剂培养基	一种用于毕赤酵母营养缺陷型筛选的基础葡萄糖液体培养基。MD 中的 "D" 指的是葡萄糖，MD中不含组氨酸，为组氨酸缺陷培养基；MDH ：在MD 培养基中加入组氨酸。
MD/MDH with Agar 粉剂培养基	一种用于毕赤酵母营养缺陷型筛选的基础葡萄糖固体培养基。MD 中的 "D" 指的是葡萄糖，MD中不含组氨酸，为组氨酸缺陷培养基；MDH ：在MD 培养基中加入组氨酸。
MDS with Agar 粉剂培养基	MDS 中的 "S" 指的是山梨醇，它是一种渗透压保护剂。MDS培养基是在经典MD培养基中添加高浓度山梨醇，兼具常规培养与渗透压调节双重功能，主要用于原生质转化后原生质体再生试验。
MM/MMH Broth 粉剂培养基	毕赤酵母蛋白表达试验中用于营养缺陷型诱导的基础甲醇液体培养基。MM 中的第二个"M" 指的是甲醇，MM中不含组氨酸，为组氨酸缺陷培养基；MMH 液体培养基：在MM 液体培养基中加入组氨酸。
MM/MMH with Agar 粉剂培养基	毕赤酵母蛋白表达试验中用于营养缺陷型诱导的基础甲醇固体培养基。MM 中的第二个"M" 指的是甲醇，MM中不含组氨酸，为组氨酸缺陷培养基；MMH 固体培养基：在MM 固体培养基中加入组氨酸。可用于毕赤酵母重组子的Mut⁺/Mutˢ甲醇利用表型鉴定试验。
MD/MDA Broth 粉剂培养基	MDA 液体培养基：在MD 液体培养基中加入腺嘌呤，主要用于适配ade2缺陷型菌株(PichiaPink 1、2、3、4)，进行毕赤酵母菌株扩繁等对照试验、Mut⁺/Mutˢ甲醇利用表型鉴定试验。
MM/MMA Broth 粉剂培养基	MMA Broth液体培养基：在MM Broth液体培养基中加入腺嘌呤，主要用于适配ade2缺陷型菌株(PichiaPink 1、2、3、4)，进行毕赤酵母菌株诱导等对照试验、Mut⁺/Mutˢ甲醇利用表型鉴定试验。
MGY/MGYA Broth 粉剂培养基	MGY适配野生型菌株，MGYA额外添加腺嘌呤，适配ade2缺陷型菌株(PichiaPink 1、2、3、4)，是毕赤酵母诱导前菌体扩繁的核心标准培养基。
MGY/MGYH Broth 粉剂培养基	基础甘油生长培养基，毕赤酵母表达系统极简无缓冲基础生长培养基，以甘油为唯一碳源，不含酵母提取物、蛋白胨、磷酸缓冲体系，成分清晰明确，专为毕赤酵母诱导前菌体扩增、菌株复苏、表型鉴定设计，是毕赤酵母诱导前菌体扩繁的核心标准培养基。常用于胞内重组蛋白的诱导前菌体扩增。
BMG/BMGH Broth 粉剂培养基	缓冲型基础甘油生长培养基，缓冲型、无酵母粉、无蛋白胨的极简生长培养基。以甘油为唯一碳源，含100 mM磷酸钾缓冲体系稳定pH 6.0，成分完全明确、本底极低。专门用于低背景、低蛋白酶、pH稳定的菌体扩增，是易降解蛋白、pH敏感蛋白、精密组学实验的专属前置生长培养基。易降解、常用于高敏感分泌蛋白的诱导前菌体扩增。
BMGY Broth 粉剂培养基	缓冲型复合甘油生长培养基，毕赤酵母表达系统中标准、通用、首选的富营养缓冲型生长培养基。以甘油为唯一碳源，含磷酸钾缓冲体系、酵母提取物、蛋白胨、YNB、生物素，用于毕赤酵母诱导前高密度菌体扩增，是毕赤酵母蛋白表达体系中优先配套 BMMY 诱导的标准生长培养基（同时适配MM、MMH、BMM、BMMH培养基）。是常规分泌型蛋白高产诱导表达的首选培养基。
BMM/BMMH Broth 粉剂培养基	缓冲型基础甲醇培养基，专为毕赤酵母重组蛋白甲醇诱导表达设计，属于无酵母提取物、无蛋白胨的成分明确型基础诱导培养基。配方中含100 mM磷酸钾缓冲体系，可稳定培养体系pH，避免蛋白表达过程中pH漂移，适配pH敏感、易被杂蛋白干扰、易降解的重组蛋白表达，同时适用于酵母代谢机制研究、同位素标记定量实验。
BMMY Broth 粉剂培养基	缓冲型复合甲醇诱导培养基，专为毕赤酵母重组蛋白诱导表达设计的富营养甲醇诱导培养基。配方中含100 mM磷酸钾缓冲体系，可稳定培养体系pH，避免蛋白表达过程中pH漂移，适配pH敏感、易被杂蛋白干扰、易降解的重组蛋白表达，同时适用于酵母代谢机制研究实验；BMMY培养基含酵母提取物、蛋白胨、YNB、生物素，以甲醇为唯一诱导碳源，毕赤酵母菌生长速度快，菌体产量高，蛋白表达量高。
50%葡萄糖溶液（过滤除菌）	作为微生物碳源使用，唯地生物的葡萄糖溶液经0.22um滤膜过滤除菌，可以直接加入培养基中使用。毕赤酵母培养基中葡萄糖的终浓度为2%，每升培养基需加入 40 mL 50%葡萄糖溶液。
10 × YNB (13.4% ,过滤除菌）	毕赤酵母基础培养基的核心营养组分，提供酵母生长全部必需的大量元素、微量元素、多种 B 族维生素，以硫酸铵作为唯一氮源，不含任何氨基酸。毕赤酵母 MD、MM、MGY、BMGY/BMMY 等所有基础培养基都必须加入1.34%的YNB。唯地生物的10X YNB溶液经0.22um滤膜过滤除菌，可以直接加入培养基中使用。
100 × A (0.2%腺嘌呤，过滤除菌)	专为PichiaPink系列腺嘌呤缺陷型毕赤酵母配套使用，可补足培养基所需腺嘌呤，完美适配缺陷型菌株的复苏活化、诱导前液体扩增、甲醇表型质控等全流程培养需求。
100 × H (0.4%组氨酸，过滤除菌)	毕赤酵母专用浓缩组氨酸母液，专门用于配制 MDH、MMH、MGYH、BMGH、BMMH 等毕赤酵母用培养基，可用于 GS115 等缺陷菌株的 Mut 表型鉴定、菌体扩增与外源蛋白诱导表达。
100 × M (50% 甲醇，过滤除菌）	毕赤酵母诱导表达专用甲醇浓缩母液，用于配制 MM、MMH、BMM、BMMH、BMMY 等毕赤酵母用甲醇诱导培养基。
500 × B (0.02%生物素，过滤除菌)	毕赤酵母专用浓缩母液，用于配制 MD、MM、MGY、BMG、BMGY、BMM、BMMY 等毕赤酵母基础 / 缓冲型培养基。
50 × GY (50% 甘油，过滤除菌）	毕赤酵母专用浓缩甘油母液，用于配制 MGY、MGYH、BMG、BMGH、BMGY 等甘油型毕赤酵母生长培养基。
10 × 磷酸钾缓冲液1M，PH6.0	毕赤酵母分泌表达专用缓冲母液。毕赤酵母利用甲醇代谢进行外源蛋白诱导时，会产生酸性代谢副产物，使培养基 pH 不断下降。磷酸钾缓冲液可以维持培养基pH值稳定在6.0附近，降低胞外蛋白酶活性，保护分泌型重组蛋白，减少蛋白降解。1 M磷酸钾缓冲液（pH 6.0）母液用于配制全部B开头缓冲培养基：BMG、BMGH、BMM、BMMH、BMGY、BMMY。
毕赤酵母Breaking Buffer	毕赤酵母胞内蛋白提取专用裂解缓冲液，主要用于酸洗玻璃珠机械破碎毕赤酵母细胞方法，裂解细胞后释放胞内重组蛋白；缓冲体系为 pH 7.4 磷酸钠体系，EDTA 螯合金属离子抑制金属蛋白酶；甘油用于保护蛋白，减少蛋白变性失活。
EDTA-free蛋白酶抑制剂cocktail I	优化配比的无EDTA广谱蛋白酶抑制剂混合母液，专为酵母（毕赤酵母、酿酒酵母等厚细胞壁酵母）及各类原核、真核细胞蛋白提取设计。精准复配四种核心抑制剂，可全面覆盖酵母、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、昆虫细胞破碎后大量释放的丝氨酸、半胱氨酸、天冬氨酸三大类蛋白酶，高效抑制裂解过程中目的蛋白的降解、截短、杂带增多等问题。
酸洗玻璃珠（Acid-Washed Glass Beads）	直径0.5 mm 酸洗玻璃珠，采用无铅钠钙玻璃微球，经浓酸充分酸洗处理，去除表面金属杂质、游离碱与碎屑粉尘，是酵母机械破碎的专用玻璃微球。适用于毕赤酵母、酿酒酵母、汉逊酵母、乳酸克鲁维酵母等厚细胞壁酵母，配合涡旋振荡仪或高频振荡仪，通过物理剪切破碎菌体；用于胞内重组蛋白提取试验。
毕赤酵母用PTM1微量元素母液（0.22um过滤除菌）	PTM是Pichia Trace Minerals的缩写,PTM1是PichiaPink1、2、3、4系列菌株常用的一种发酵用微量元素配方，多在流加营养液时添加，为毕赤酵母发酵试验补充微量元素