产品说明

PD with Agar是一种半合成腺嘌呤缺陷酵母培养基。PD培养基缺失腺嘌呤(Ade)，含有除腺嘌呤外的所有必须氨基酸、尿嘧啶、微量元素、大量元素、维生素、葡萄糖等营养成分，可以用来筛选含有表达腺嘌呤合成基因的酵母，主要用于PichiaPink1、2、3、4四种毕赤酵母的质粒转化筛选试验。pPink-HC、 pPink-LC、pPinkα-HC这三个质粒都有Ade2筛选标记，先对质粒做单酶切，将线性化的质粒回收后转化毕赤酵母感受态细胞，涂布在PD平板上，PichiaPink 1、2、3、4菌株均为腺嘌呤营养缺陷型，只有线性化质粒重组成功的毕赤酵母细胞才能正常生长，长出的菌落有三种颜色：1，白色菌落，2，淡红色菌落，3，紫红色菌落(ADE2基因表达量低时，Adenine合成途径受阻；又由于其ADE4,5,6,7,8基因均正常，所以造成中间产物P-ribosylamino imidazole在细胞中积累而使菌落变为粉红色)，菌落颜色直接反映酵母细胞中Ade2基因的表达量，Ade2蛋白表达量越高，菌落越白，表达量越低，菌落越红，由此推测菌落越白，重组进酵母基因组的质粒拷贝数越高，目的蛋白表达量越高，所以挑菌时尽量挑白色的菌落用于后续的蛋白表达试验。