显色相关培养基与试剂

产品说明
IPTG即Isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,异丙基-β-D-1-硫代半乳糖吡喃糖苷,常用于大肠杆菌的蓝白斑筛选试验。宿主和质粒编码的片段虽都没有半乳糖苷酶活性,但它们同时存在时,α片段与ω片段可通过α-互补形成具有酶活性的β-半乳糖苷酶,由α-互补而产生的LacZ细菌在诱导剂IPTG的作用下,在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落;而当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后,破坏了α片段的编码,使得带有重组质粒的LacZ细菌形成白色菌落,这种重组子的筛选,称为蓝白斑筛选;此外,IPTG它还可以作为具有lac或tac等启动子的表达载体的蛋白表达诱导剂使用。唯地生物的 IPTG 溶液(过滤除菌)经0.22um滤膜过滤除菌,可以直接加入培养基使用。
产品规格
货号
规格
目录价
YC8022S
5 ml/支
80
YC8022M
5 ml×10支
600
产品内容
包装名称
包装含量
保存条件
保存时间
IPTG 溶液(1M,过滤除菌)
5 ml/支
-20℃/避光
24个月
产品组分与配方
![]()
ddH2O
产品组分
分子式/CAS号/分子量
配方
除菌方式
异丙基-β-D-1-硫代半乳糖吡喃糖苷(IPTG)
C9H18O5S/367-93-1/238.30
1M/100mg/ml
0.22um过滤
------
------
------
使用方法
一,蓝白斑筛选方法
1.倒平板:LB固体培养基微波炉加热融化后或高压灭菌后冷却至55℃以下,每100ml培养基中加入 200ul 20mg/ml的 X-gal 溶液,40ul 100mg/ml的IPTG 溶液和相应的抗生素溶液混匀倒平板即可。
2.也可直接将X-gal和IPTG溶液涂布在LB平板表面:例如,直径90mm 的平板(约20ml培养基)可以直接加入 40ul 20mg/ml的 X-gal 溶液,8ul 100mg/ml的IPTG,用无菌涂布棒涂布均匀即可。
二,原核蛋白诱导表达方法
1. 原核表达菌液在37度,200rpm培养,待OD600=0.5~0.6,吸出3ml左右作为空白对照,剩下的菌液加入IPTG溶液,不同蛋白对IPTG浓度和摇菌温度要求不同,为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。一般情况下IPTG浓度在0.1mM-20mM之间,1mM是最常用的IPTG起始诱导浓度,也可设置不同的IPTG浓度梯度(例如:0.1mM,0.2mM,0.5mM,1mM,2mM,5mM,10mM,20mM)。
三,1 M IPTG溶液配制
2.38 g IPTG加入去离子水定容到10 mL,完全溶解后用0.22um的滤膜过滤除菌。
四,100 mg/ml IPTG溶液配制
1g IPTG加入去离子水定容到10 mL,完全溶解后用0.22um的滤膜过滤除菌。
产品参数:
CAS:367-93-1
英文名称:IPTG(Isopropyl β-D-1-Thiogalactopyranoside)
中文名:异丙基-β-D-1-硫代半乳糖苷
分子量:238.31
分子式:C9H18O5S
纯度:≥99.3%
外观:白色结晶或粉末
溶解性:易溶于水
注意事项
1.温度降低时IPTG 溶液(过滤除菌)可能会有沉淀析出,如有沉淀将IPTG 溶液放37℃预热可重新溶解,也可剧烈摇晃促进溶解。
2. 不开封的 IPTG 溶液(过滤除菌)可在-20℃保存2年,开封后若发现染菌,停止使用。
产品规格
货号
规格
目录价
YC8022S
5 ml/支
80
YC8022M
5 ml×10支
600
产品内容
包装名称
包装含量
保存条件
保存时间
IPTG 溶液(1M,过滤除菌)
5 ml/支
-20℃/避光
24个月
产品组分与配方
![]()
ddH2O
产品组分
分子式/CAS号/分子量
配方
除菌方式
异丙基-β-D-1-硫代半乳糖吡喃糖苷(IPTG)
C9H18O5S/367-93-1/238.30
1M/100mg/ml
0.22um过滤
------
------
------
使用方法
一,蓝白斑筛选方法
1.倒平板:LB固体培养基微波炉加热融化后或高压灭菌后冷却至55℃以下,每100ml培养基中加入 200ul 20mg/ml的 X-gal 溶液,40ul 100mg/ml的IPTG 溶液和相应的抗生素溶液混匀倒平板即可。
2.也可直接将X-gal和IPTG溶液涂布在LB平板表面:例如,直径90mm 的平板(约20ml培养基)可以直接加入 40ul 20mg/ml的 X-gal 溶液,8ul 100mg/ml的IPTG,用无菌涂布棒涂布均匀即可。
二,原核蛋白诱导表达方法
1. 原核表达菌液在37度,200rpm培养,待OD600=0.5~0.6,吸出3ml左右作为空白对照,剩下的菌液加入IPTG溶液,不同蛋白对IPTG浓度和摇菌温度要求不同,为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。一般情况下IPTG浓度在0.1mM-20mM之间,1mM是最常用的IPTG起始诱导浓度,也可设置不同的IPTG浓度梯度(例如:0.1mM,0.2mM,0.5mM,1mM,2mM,5mM,10mM,20mM)。
三,1 M IPTG溶液配制
2.38 g IPTG加入去离子水定容到10 mL,完全溶解后用0.22um的滤膜过滤除菌。
四,100 mg/ml IPTG溶液配制
1g IPTG加入去离子水定容到10 mL,完全溶解后用0.22um的滤膜过滤除菌。
产品参数:
CAS:367-93-1
英文名称:IPTG(Isopropyl β-D-1-Thiogalactopyranoside)
中文名:异丙基-β-D-1-硫代半乳糖苷
分子量:238.31
分子式:C9H18O5S
纯度:≥99.3%
外观:白色结晶或粉末
溶解性:易溶于水
注意事项
1.温度降低时IPTG 溶液(过滤除菌)可能会有沉淀析出,如有沉淀将IPTG 溶液放37℃预热可重新溶解,也可剧烈摇晃促进溶解。
2. 不开封的 IPTG 溶液(过滤除菌)可在-20℃保存2年,开封后若发现染菌,停止使用。




