昆虫细胞蛋白表达/纯化
产品说明
与 NovaLyse™ 裂解体系配套设计，裂解上清可直接上样，无需透析或换液。
双洗涤策略：Wash Buffer A 针对昆虫细胞常见的非特异结合杂带，纯度优先、得率略低；Wash Buffer B 采用温和条件，最大限度保留弱结合的目标蛋白，得率优先、纯度一般；两者也可先 B 后 A 串联使用。
三种纯化模式：① 孵育法——适用于样品体积大 / 黏度高 / 表达量低，延长接触时间提高结合率；② 过柱法——适用于样品澄清、表达量充足，重力流最快，持续冲洗降低本底；③ 管内结合–柱上洗脱法（推荐）——先充分结合，再以连续流冲洗，纯度与得率兼顾。
产品规格
名称
货号
规格
目录价
NovaPure™ 昆虫细胞专属 His 标签蛋白小量纯化试剂盒
INK3401
10 次（1 mL 培养物，200 μL 填料/次）
1200
产品内容
编号
货号
组分名称
规格
保存条件
A
CO5001
NovaPure™ Ni NTA Beads（镍填料）
2 mL
2–8 ℃，严禁冻存
B
BS5001
NovaPure™ Binding / Equilibration Buffer
50 mL
室温或 2–8 ℃
C
BS5002
NovaPure™ Wash Buffer A（高纯度洗涤液）
50 mL
室温或 2–8 ℃
D
BS5003
NovaPure™ Wash Buffer B（高得率洗涤液）
50 mL
室温或 2–8 ℃
E
BS5004
NovaPure™ Elution Buffer（洗脱缓冲液）
30 mL
室温或 2–8 ℃
F
CO5101
NovaPure™ 1.5 mL 空柱
10 支
室温
产品简介
昆虫细胞裂解液中存在多种表面组氨酸富集的内源蛋白，会与镍离子产生真实亲和，使本底显著高于大肠杆菌体系。一味提高洗涤咪唑浓度虽能去杂，却会同时冲走目的蛋白。本试剂盒同时提供 Wash Buffer A 与 Wash Buffer B 两种洗涤液：A 侧重纯度、B 侧重得率，可按实验目的选择，也可串联使用。
▍适用与不适用：适用于带 His-tag（His₆–His₁₀）的可溶性重组蛋白；不适用于变性条件纯化与包涵体处理、跨膜蛋白，以及含 EDTA、EGTA 或 > 1 mM DTT 的样品（须先脱盐或稀释）。
推荐操作步骤
一、 裂解与体系处理
1. 向 1 mL 含细胞的完整培养物中直接加入 100 μL 的 10× NovaLyse™ 裂解试剂（货号：INK3301），上下颠倒混匀。
2. 加入 1–2 μL 全能核酸酶（Benzonase Nuclease，货号：GR5015）及 2 μL 500× Protease Inhibitor Cocktail（EDTA-free，货号：GR4001），室温孵育 15 min。
3. 使用 NovaLyse™ 的样本可免去离心与过滤，直接上柱；传统破碎法样本需 12,000 × g、4 ℃ 离心 20 min 取上清。
二、填料平衡与结合
1. 用剪去尖端的 1 mL 枪头吸取 100–200 μL 填料至 1.5 mL 离心管；加入 1 mL Binding / Equilibration Buffer 轻柔颠倒混匀，500 × g 离心 2 min 弃上清，重复一次。
2. 将裂解好的样本（约 1 mL）加入装有平衡填料的离心管，4 ℃ 旋转混匀器孵育 15–60 min（低表达量样本可延长至 2 h）。严禁剧烈涡旋。
三、装柱、洗杂与洗脱
1. 将 1.5 mL 空柱插在收集管上，用剪去尖端的枪头把「填料 + 样本」混合物分批加入柱中，打开下口使液体流出形成柱床；流出液即流穿液，建议留样。
2. ★ 洗杂二选一 —— 方案 A（纯度优先）：先 2 mL Wash Buffer A，再 2 mL Wash Buffer B；方案 B（得率优先）：仅用 2 mL Wash Buffer B。
3. 待洗杂液流尽，将柱移入洁净 1.5 或 2.0 mL 离心管，加入 300–600 μL Elution Buffer，收集自然流出的洗脱液。
4. 如追求极限得率，可重复洗脱一次；洗脱后如用于下游功能实验，请脱盐或透析去除咪唑。
产品规格
名称
货号
规格
目录价
NovaPure™ 昆虫细胞专属 His 标签蛋白小量纯化试剂盒
INK3401
10 次（1 mL 培养物，200 μL 填料/次）
1200
产品内容
编号
货号
组分名称
规格
保存条件
A
CO5001
NovaPure™ Ni NTA Beads（镍填料）
2 mL
2–8 ℃，严禁冻存
B
BS5001
NovaPure™ Binding / Equilibration Buffer
50 mL
室温或 2–8 ℃
C
BS5002
NovaPure™ Wash Buffer A（高纯度洗涤液）
50 mL
室温或 2–8 ℃
D
BS5003
NovaPure™ Wash Buffer B（高得率洗涤液）
50 mL
室温或 2–8 ℃
E
BS5004
NovaPure™ Elution Buffer（洗脱缓冲液）
30 mL
室温或 2–8 ℃
F
CO5101
NovaPure™ 1.5 mL 空柱
10 支
室温
产品简介
昆虫细胞裂解液中存在多种表面组氨酸富集的内源蛋白，会与镍离子产生真实亲和，使本底显著高于大肠杆菌体系。一味提高洗涤咪唑浓度虽能去杂，却会同时冲走目的蛋白。本试剂盒同时提供 Wash Buffer A 与 Wash Buffer B 两种洗涤液：A 侧重纯度、B 侧重得率，可按实验目的选择，也可串联使用。
▍适用与不适用：适用于带 His-tag（His₆–His₁₀）的可溶性重组蛋白；不适用于变性条件纯化与包涵体处理、跨膜蛋白，以及含 EDTA、EGTA 或 > 1 mM DTT 的样品（须先脱盐或稀释）。
推荐操作步骤
一、 裂解与体系处理
1. 向 1 mL 含细胞的完整培养物中直接加入 100 μL 的 10× NovaLyse™ 裂解试剂（货号：INK3301），上下颠倒混匀。
2. 加入 1–2 μL 全能核酸酶（Benzonase Nuclease，货号：GR5015）及 2 μL 500× Protease Inhibitor Cocktail（EDTA-free，货号：GR4001），室温孵育 15 min。
3. 使用 NovaLyse™ 的样本可免去离心与过滤，直接上柱；传统破碎法样本需 12,000 × g、4 ℃ 离心 20 min 取上清。
二、填料平衡与结合
1. 用剪去尖端的 1 mL 枪头吸取 100–200 μL 填料至 1.5 mL 离心管；加入 1 mL Binding / Equilibration Buffer 轻柔颠倒混匀，500 × g 离心 2 min 弃上清，重复一次。
2. 将裂解好的样本（约 1 mL）加入装有平衡填料的离心管，4 ℃ 旋转混匀器孵育 15–60 min（低表达量样本可延长至 2 h）。严禁剧烈涡旋。
三、装柱、洗杂与洗脱
1. 将 1.5 mL 空柱插在收集管上，用剪去尖端的枪头把「填料 + 样本」混合物分批加入柱中，打开下口使液体流出形成柱床；流出液即流穿液，建议留样。
2. ★ 洗杂二选一 —— 方案 A（纯度优先）：先 2 mL Wash Buffer A，再 2 mL Wash Buffer B；方案 B（得率优先）：仅用 2 mL Wash Buffer B。
3. 待洗杂液流尽，将柱移入洁净 1.5 或 2.0 mL 离心管，加入 300–600 μL Elution Buffer，收集自然流出的洗脱液。
4. 如追求极限得率，可重复洗脱一次；洗脱后如用于下游功能实验，请脱盐或透析去除咪唑。
引用唯地生物产品SCI文献统计信息
