昆虫细胞蛋白表达/纯化
产品说明
以质粒直接转染 High Five 细胞的瞬时表达路线：跳过 Bacmid 构建、P0/P1/P2 病毒扩增与滴度测定，全程无病毒操作，降低生物安全等级要求与交叉污染风险。
周期：从质粒提取到拿到表达结果 3–5 天；含质粒构建在内的完整周期 6–7 天。相较杆状病毒路线的 21–28 天，筛选阶段时间压缩比约 4×——同样一个月可以多验证 3–5 倍的构建体。
已验证的表达类型：报告蛋白（EGFP，转染后 48 h 荧光显微镜可见，也可用在胶荧光 in-gel fluorescence 作质控）；膜蛋白 / 复合物（拟南芥水通道蛋白 Aquaporin PIP2-1，48 h；昆虫细胞膜系统丰富，适合 GPCR、转运体与多亚基复合物）；活性酶（lacZ β-半乳糖苷酶，可用 ONPG 法直接测活验证表达）。具体表达量取决于目的蛋白性质，以上仅作量级参考。
关于产量：单链、不需要多亚基组装的简单蛋白，用瞬转就够——单位体积产量虽然不如杆状病毒感染路线，但可以用体积补：需要更多蛋白时按比例扩大培养体积即可拿到足量样品，不必为了拿量专门去构建病毒。
到货即可开始，不依赖实验室既有的杆状病毒体系；盒内含 GFP 阳性对照质粒，首次上手也能区分“构建体不行”与“操作不行”，失败成本低。
产品规格
名称
货号
规格
目录价
NovaRapid™ 昆虫细胞快速瞬时表达系统
INK2001
一盒
6470
产品内容
箱号
成分
货号
规格
保存条件
目录价
Box 1
High Five 昆虫细胞
Bic1050
1 mL × 1 管
–80 ℃（2 年）或液氮（长期）
1600
Box 2
pNovaRapid-gfp / -mel / -HSP40 / -HSC70
PIC2011 / 2012 / 2013 / 2021
各 20 μL × 1 管
−20 ℃
各800
Box 3
NovaFect™ 昆虫细胞转染试剂 + 稀释液
INT1001M
1.5 mL + 25 mL
4 ℃（勿冻）
1350
Box 4
Nova SFM™ 昆虫细胞无血清培养基
IM1011S
500 mL × 1 瓶
4 ℃（勿冻）
320
整套货号：NovaRapid™ 昆虫细胞快速瞬时表达系统整套 Kit （货号：INK2001）；整套运输：干冰 + 冰袋。
产品简介
传统杆状病毒表达系统必须经历重组病毒构建、筛选、P1/P2 代扩增以及滴度测定，整个周期通常 3 周以上，难以满足高通量筛选与快速原型验证的需求。NovaRapid™ 基于质粒瞬时转染原理，无需构建重组病毒，将携带目的基因的 pNovaRapid 系列质粒直接转染至 High Five 细胞，48–72 小时即可收获目的蛋白。
载体核心元件为 AcNPV 来源的 hr5 增强子与 ie1 启动子组合，利用昆虫细胞自身内源转录机制驱动表达，不依赖病毒感染，因此可避免细胞病变效应（CPE）带来的翻译后修饰异常、蛋白降解与分泌途径受损。
▍系统优势
● 快速：转染后 48 小时即可收获目的蛋白；从质粒提取到拿到结果约 3–5 天。
● 高产：单毫升培养上清可获得高达 80 μg 目的蛋白，大规模培养可达每升数十毫克。
● 简便：无需病毒包装与滴度测定；无需 BSL-1 以上病毒操作空间。
● 可放大：从 24 孔板到升级规模的悬浮培养体系均适用。
推荐操作步骤
一、 工作流程（3–5 天）
● 第 1 天：准备指数生长期 High Five 细胞；制备转染级别高纯度质粒 DNA；铺板。
● 第 2 天：配制转染复合物并转染。
● 第 3 天起：转染后 48 小时收获细胞或培养上清（部分蛋白 72 小时更高）。
|
参数 |
6 孔板（静置） |
6 孔板（悬浮） |
12 孔板（悬浮） |
10 mL（悬浮） |
|
细胞密度（cells/mL） |
0.5 × 10⁶ |
2 × 10⁶ |
2 × 10⁶ |
2 × 10⁶ |
|
培养体积 |
2.0 mL/孔 |
2.0 mL/孔 |
1.0 mL/孔 |
10 mL/瓶 |
|
转染稀释液 |
100 μL |
200 μL |
100 μL |
1000 μL |
|
质粒 DNA 用量 |
2 μg |
4 μg |
2 μg |
20 μg |
|
NovaFect™ 转染试剂 |
8 μL |
16 μL |
8 μL |
80 μL |
二、10 mL 悬浮转染流程（推荐用于蛋白制备）
1. 向 125 mL 摇瓶中接种 10 mL、2 × 10⁶ cells/mL 的 High Five 细胞。
2. 无菌管中加入 1 mL NovaFect™ 转染稀释液，加入 20 μg 质粒混匀。
3. 加入 80 μL NovaFect™ 转染试剂，立即轻柔涡旋混匀，避免沉淀。
4. 室温孵育 15 分钟形成复合物。
5. 将全部混合物滴加至 10 mL 细胞培养液中（不可直接倾入），置于 28 ℃ 摇床 90 rpm（振幅 50 mm）培养 48 小时。
6. 48 小时后收获细胞与培养上清；推荐使用 NovaLyse™ 昆虫细胞直接裂解试剂盒（货号：INK3301）裂解，一步裂解、免超声、免离心，无缝兼容镍柱。
产品规格
名称
货号
规格
目录价
NovaRapid™ 昆虫细胞快速瞬时表达系统
INK2001
一盒
6470
产品内容
箱号
成分
货号
规格
保存条件
目录价
Box 1
High Five 昆虫细胞
Bic1050
1 mL × 1 管
–80 ℃（2 年）或液氮（长期）
1600
Box 2
pNovaRapid-gfp / -mel / -HSP40 / -HSC70
PIC2011 / 2012 / 2013 / 2021
各 20 μL × 1 管
−20 ℃
各800
Box 3
NovaFect™ 昆虫细胞转染试剂 + 稀释液
INT1001M
1.5 mL + 25 mL
4 ℃（勿冻）
1350
Box 4
Nova SFM™ 昆虫细胞无血清培养基
IM1011S
500 mL × 1 瓶
4 ℃（勿冻）
320
整套货号：NovaRapid™ 昆虫细胞快速瞬时表达系统整套 Kit （货号：INK2001）；整套运输：干冰 + 冰袋。
产品简介
传统杆状病毒表达系统必须经历重组病毒构建、筛选、P1/P2 代扩增以及滴度测定，整个周期通常 3 周以上，难以满足高通量筛选与快速原型验证的需求。NovaRapid™ 基于质粒瞬时转染原理，无需构建重组病毒，将携带目的基因的 pNovaRapid 系列质粒直接转染至 High Five 细胞，48–72 小时即可收获目的蛋白。
载体核心元件为 AcNPV 来源的 hr5 增强子与 ie1 启动子组合，利用昆虫细胞自身内源转录机制驱动表达，不依赖病毒感染，因此可避免细胞病变效应（CPE）带来的翻译后修饰异常、蛋白降解与分泌途径受损。
▍系统优势
● 快速：转染后 48 小时即可收获目的蛋白；从质粒提取到拿到结果约 3–5 天。
● 高产：单毫升培养上清可获得高达 80 μg 目的蛋白，大规模培养可达每升数十毫克。
● 简便：无需病毒包装与滴度测定；无需 BSL-1 以上病毒操作空间。
● 可放大：从 24 孔板到升级规模的悬浮培养体系均适用。
推荐操作步骤
一、 工作流程（3–5 天）
● 第 1 天：准备指数生长期 High Five 细胞；制备转染级别高纯度质粒 DNA；铺板。
● 第 2 天：配制转染复合物并转染。
● 第 3 天起：转染后 48 小时收获细胞或培养上清（部分蛋白 72 小时更高）。
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参数 |
6 孔板（静置） |
6 孔板（悬浮） |
12 孔板（悬浮） |
10 mL（悬浮） |
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细胞密度（cells/mL） |
0.5 × 10⁶ |
2 × 10⁶ |
2 × 10⁶ |
2 × 10⁶ |
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培养体积 |
2.0 mL/孔 |
2.0 mL/孔 |
1.0 mL/孔 |
10 mL/瓶 |
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转染稀释液 |
100 μL |
200 μL |
100 μL |
1000 μL |
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质粒 DNA 用量 |
2 μg |
4 μg |
2 μg |
20 μg |
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NovaFect™ 转染试剂 |
8 μL |
16 μL |
8 μL |
80 μL |
二、10 mL 悬浮转染流程（推荐用于蛋白制备）
1. 向 125 mL 摇瓶中接种 10 mL、2 × 10⁶ cells/mL 的 High Five 细胞。
2. 无菌管中加入 1 mL NovaFect™ 转染稀释液，加入 20 μg 质粒混匀。
3. 加入 80 μL NovaFect™ 转染试剂，立即轻柔涡旋混匀，避免沉淀。
4. 室温孵育 15 分钟形成复合物。
5. 将全部混合物滴加至 10 mL 细胞培养液中（不可直接倾入），置于 28 ℃ 摇床 90 rpm（振幅 50 mm）培养 48 小时。
6. 48 小时后收获细胞与培养上清；推荐使用 NovaLyse™ 昆虫细胞直接裂解试剂盒（货号：INK3301）裂解，一步裂解、免超声、免离心，无缝兼容镍柱。
引用唯地生物产品SCI文献统计信息
