昆虫细胞蛋白表达/纯化
产品说明
针对昆虫细胞膜特性与无血清培养环境专门优化的阳离子聚合物体系，Sf9 与 High Five 均可获得高比例阳性细胞。
三个核心特点：① 转染效率高——在 NovaBac™（BEVS）体系、Sf9 细胞、转染后第 4 天条件下，GFP 阳性率可达 98%，且该数据是在完全不更换培养基的条件下测得；② 无需换液——转染复合物在完全培养基中稳定，加入后全程无需更换培养基，省去离心、弃上清、重悬三步；③ 细胞毒性低——转染后 48 h 细胞活率维持在高位，表达窗口更长，尤其利于分泌型蛋白累积。
操作流程（三步，中间不碰细胞）：① 混合，约 2 min——质粒 DNA 加入转染稀释液，再加入 NovaFect™ 转染试剂；② 静置 15 min——室温静置形成转染复合物；③ 加入，约 1 min——复合物直接滴加至培养中的细胞，摇匀后放回 27 ℃；随后 48–72 h 直接收样检测，全程无需换液。
产品规格
产品名称与组分
货号
规格
目录价
NovaFect™ 昆虫细胞转染试剂 + 转染稀释液
ITK1001S
0.5 mL + 10 mL
500
ITK1001M
1.5 mL + 25 mL
1350
ITK1001L
1.5 mL × 5 + 25 mL × 5
4387
|
|
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产品内容
包装名称
包装数量
保存条件
保存时间
NovaFect™ 昆虫细胞转染试剂盒
1盒
4 ℃，勿冻
——
组分单独货号：NovaFect™ 昆虫细胞转染试剂：INT1001S（0.5 mL）/ INT1001M（1.5 mL）；转染稀释液不单独编号。储存于 4 ℃，切勿冻存。
产品简介
本产品包含 NovaFect™ 昆虫细胞转染试剂与 NovaFect™ 昆虫细胞转染稀释液。转染试剂是一种高电荷阳离子聚合物，能与带负电的 DNA、RNA 等核酸分子高效形成稳定的聚电解质复合物（polyplex）；复合物经胞吞进入细胞后，在内体酸化过程中通过「质子海绵效应」释放核酸至胞质。稀释液为经过优化的配套稀释体系，可提高复合物形成效率。
本产品转染效率高、细胞毒性低、重复性好、操作简便。转染后无需传统 4 小时换液步骤，可直接继续培养。
▍适用于
● 昆虫细胞瞬时转染（NovaRapid™ 快速瞬时表达系统，货号：INK2001）。
● 杆状病毒包装实验（NovaBac™ 杆状病毒表达系统，货号：INK1001）。
推荐操作步骤
一、 瞬时快速转染（配合 NovaRapid™ 系统，宿主 High Five）
1. 计数确认细胞活率 ≥ 95 %、处于对数期（用本司培养基时 High Five 密度为 2–5 × 10⁶ cells/mL）。
2. 1100 rpm 室温离心，用预热的 Nova SFM™ 昆虫细胞无血清培养基（货号：IM1011S）将密度调整为 2.0 × 10⁶ cells/mL。
3. 质粒须用无内毒素质粒提取试剂盒提取，内毒素 ≤ 0.1 EU，超螺旋率 ≥ 80 %。
4. 以 1 mL 细胞为例：取 100 μL 转染稀释液于灭菌 1.5 mL 离心管，加入 2 μg 质粒旋涡混匀，再加入 8 μL 转染试剂旋涡混匀，室温静置 15–20 min（中间不要晃动）。
5. 将混合液滴加至 High Five 细胞培养物中混匀，放入摇床培养。
6. 48 小时收取蛋白。
培养容器
12 孔板
6 孔板
125 mL 三角瓶
细胞悬浮液体积
1 mL
2 mL
25 mL
转染稀释液
100 μL
200 μL
5.0 mL
pNovaRapid 系列质粒
2 μg
4 μg
50 μg
NovaFect™ 转染试剂
8 μL
16 μL
200 μL
二、 杆状病毒包装（配合 NovaBac™ 系统，宿主 Sf9）
1. 计数确认细胞活率 ≥ 95 %、处于对数期（Sf9 密度 2–5 × 10⁶ cells/mL）。
2. 1100 rpm 室温离心，用新鲜 Nova 921 SFM™ 昆虫细胞无血清培养基（货号：IM1001S）调整至所需密度；六孔板每孔接种 0.8–0.95 × 10⁶ 细胞（2 mL），密度约 70–90 %，27–28 ℃ 静置 ≥ 15 min。
3. 以六孔板为例：取 200 μL 转染稀释液，加入 16 μg Bacmid（建议使用 NovaBac™ 大质粒 / Bacmid 中量提取试剂盒，货号：EVK3210M），颠倒混匀；再加入 8 μL 转染试剂，颠倒混匀，室温静置 15–20 min。
4. 将混合液均匀滴加到整个孔内，轻轻混匀。
5. 27–28 ℃ 继续培养 3–5 天，收集培养液；500 × g 离心 5 min 获得 P0 代病毒（滴度通常 1 × 10⁶ – 1 × 10⁷ pfu/mL）。
6. P0 病毒 4 ℃ 保存并加胎牛血清至终浓度 2 %；长期保存分装至 –80 ℃，避免反复冻融。
产品规格
产品名称与组分
货号
规格
目录价
NovaFect™ 昆虫细胞转染试剂 + 转染稀释液
ITK1001S
0.5 mL + 10 mL
500
ITK1001M
1.5 mL + 25 mL
1350
ITK1001L
1.5 mL × 5 + 25 mL × 5
4387
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产品内容
包装名称
包装数量
保存条件
保存时间
NovaFect™ 昆虫细胞转染试剂盒
1盒
4 ℃，勿冻
——
组分单独货号：NovaFect™ 昆虫细胞转染试剂：INT1001S（0.5 mL）/ INT1001M（1.5 mL）；转染稀释液不单独编号。储存于 4 ℃，切勿冻存。
产品简介
本产品包含 NovaFect™ 昆虫细胞转染试剂与 NovaFect™ 昆虫细胞转染稀释液。转染试剂是一种高电荷阳离子聚合物，能与带负电的 DNA、RNA 等核酸分子高效形成稳定的聚电解质复合物（polyplex）；复合物经胞吞进入细胞后，在内体酸化过程中通过「质子海绵效应」释放核酸至胞质。稀释液为经过优化的配套稀释体系，可提高复合物形成效率。
本产品转染效率高、细胞毒性低、重复性好、操作简便。转染后无需传统 4 小时换液步骤，可直接继续培养。
▍适用于
● 昆虫细胞瞬时转染（NovaRapid™ 快速瞬时表达系统，货号：INK2001）。
● 杆状病毒包装实验（NovaBac™ 杆状病毒表达系统，货号：INK1001）。
推荐操作步骤
一、 瞬时快速转染（配合 NovaRapid™ 系统，宿主 High Five）
1. 计数确认细胞活率 ≥ 95 %、处于对数期（用本司培养基时 High Five 密度为 2–5 × 10⁶ cells/mL）。
2. 1100 rpm 室温离心，用预热的 Nova SFM™ 昆虫细胞无血清培养基（货号：IM1011S）将密度调整为 2.0 × 10⁶ cells/mL。
3. 质粒须用无内毒素质粒提取试剂盒提取，内毒素 ≤ 0.1 EU，超螺旋率 ≥ 80 %。
4. 以 1 mL 细胞为例：取 100 μL 转染稀释液于灭菌 1.5 mL 离心管，加入 2 μg 质粒旋涡混匀，再加入 8 μL 转染试剂旋涡混匀，室温静置 15–20 min（中间不要晃动）。
5. 将混合液滴加至 High Five 细胞培养物中混匀，放入摇床培养。
6. 48 小时收取蛋白。
培养容器
12 孔板
6 孔板
125 mL 三角瓶
细胞悬浮液体积
1 mL
2 mL
25 mL
转染稀释液
100 μL
200 μL
5.0 mL
pNovaRapid 系列质粒
2 μg
4 μg
50 μg
NovaFect™ 转染试剂
8 μL
16 μL
200 μL
二、 杆状病毒包装（配合 NovaBac™ 系统，宿主 Sf9）
1. 计数确认细胞活率 ≥ 95 %、处于对数期（Sf9 密度 2–5 × 10⁶ cells/mL）。
2. 1100 rpm 室温离心，用新鲜 Nova 921 SFM™ 昆虫细胞无血清培养基（货号：IM1001S）调整至所需密度；六孔板每孔接种 0.8–0.95 × 10⁶ 细胞（2 mL），密度约 70–90 %，27–28 ℃ 静置 ≥ 15 min。
3. 以六孔板为例：取 200 μL 转染稀释液，加入 16 μg Bacmid（建议使用 NovaBac™ 大质粒 / Bacmid 中量提取试剂盒，货号：EVK3210M），颠倒混匀；再加入 8 μL 转染试剂，颠倒混匀，室温静置 15–20 min。
4. 将混合液均匀滴加到整个孔内，轻轻混匀。
5. 27–28 ℃ 继续培养 3–5 天，收集培养液；500 × g 离心 5 min 获得 P0 代病毒（滴度通常 1 × 10⁶ – 1 × 10⁷ pfu/mL）。
6. P0 病毒 4 ℃ 保存并加胎牛血清至终浓度 2 %；长期保存分装至 –80 ℃，避免反复冻融。
引用唯地生物产品SCI文献统计信息
