产品规格

使用方法

一，本产品为即用型YPD Plus Liquid Medium，已经121℃-20min高压灭菌（葡萄糖组分过滤除菌），可直接取室温的YPD Plus Liquid Medium适量体积使用。

二，感受态转化方法

1. Carrier DNA 在每次使用前要通过加热处理使其变性为单链状态，步骤如下：Carrier DNA 放95℃水浴或金属浴3 min，快速插入冰中，静置3 min，再次放95℃水浴或金属浴3 min，快速插入冰中，静置3 min以上。          

酵母文库质粒         普通酵母质粒

2.准备不同大小的离心管-------------------------------------------------------------15ml离心管               1.5ml离心管

依次加入预冷的目的质粒-----------------------------------------------------------------5-15ug                0.1-2ug

Carrier DNA -------------------------------------------------------------------------------40 µl                5 µl

酵母感受态---------------------------------------------------------------------------------600ul                50-100ul

PEG/LiAc-----------------------------------------------------------------------------------2.5ml               500 µl              

吸打几次混匀，30℃水浴------------------------------------------------------------------45 min               30 min              

(文库质粒每隔15min翻转6-8次混匀一次；普通质粒每隔10min翻转6-8次混匀一次。）

3.加入无菌的DMSO------------------------------------------------------------------------160ul                0ul

4.将管放42℃水浴--------------------------------------------------------------------------20min              15min

(文库质粒每隔10min翻转6-8次混匀一次；普通质粒每隔7.5min翻转6-8次混匀一次。）

5. 4000 rpm离心40s弃上清，加入YPD Plus重悬----------------------------------------------3ml                 1ml

6.30℃，200rpm摇菌1.5h。离心 30s弃上清。

7.加入 0.9% (w/v) NaCl重悬，涂板，30℃培养48-120 h。--------------------------------5-10ml             0.05ml

注意事项

1. YPD Plus Liquid Medium可直接使用，无需过滤或高温灭菌；若发现有浑浊产生，立即丢弃。

2. 客户使用时需在无菌室或无菌超净台中打开，室温可保存一年，若长期保存请置于-20度，可保存两年。